干扰素概述

　　1957年，Isaacs和Lindemann在研究病毒的干扰现象时，发现将56℃l小时灭活的流感病毒加火鸡胚戎毛尿囊膜碎片中，经孵育后此膜不但获得了抗流感病毒的能力，而且释放了一种具有干扰活性的因子即命名为干扰素（Interferon,IFN），它具有抗酸的能力。在以后十年中，人们利用不同动物的不同细胞制备了不同的IFN。当时认为，干扰素是细胞接触病毒所产生的干扰病毒生长繁殖的一种蛋白质，随着干扰素研究的深入，干扰素的定义也越来越完善，现在认为：IFN是多种诱导剂（病毒、细菌和大分子等）诱导细胞产生的具有抗病毒、抗肿瘤和免疫调节功能的一类蛋白质。而且认为在由特定的诱导物（包括病毒与非病毒物质）作用下，由细胞基因组编码产生的一种或多种蛋白质，即为干扰素。这种蛋白质并非直接作用于病毒，其活性又受到另一组细胞基因的调控，即在干扰素作用于细胞时，又诱生另一类基因产物，由于这类基因产物引起细胞具有广泛的抗病毒活性，抑制细胞分裂和肿瘤细胞增殖以及调控免疫系统功能的活性。这是一个系统，故称为干扰素系统。目前, 发现能产生干扰素的细胞主要为脊椎动物细胞。其它无脊椎动物（贝壳类和昆虫）以及植物细胞内（如丁香、番椒等）亦发现有干扰素类似物。因此，现认为干扰素是细胞基因自我稳定的反应产物，能经细胞内一系列其它基因的诱导或抑制，调控细胞功能，防御外来物质（尤其异种核酸如病毒）的进入，维持细胞的正常生理功能。干扰素系统是生物细胞普遍存在的一个防御系统，也可说是除免疫系统外的另一个防御系统，对生物的生存与进化有重要意义。

　　干扰素的分类
　　1. 天然IFN
　　根据国际干扰素命名委员会的建议，天然IFN一般首先按动物来源分类，例如人干扰素(HuIFN)，牛干扰素(BovIFN)等, 然后再按IFN的抗原特异性和分子结构分成不同的型别，加以命名。
　　天然干扰素种类繁多，分子量也不同，亦有不同的抗原性。目前了解由人的不同细胞产生的干扰素至少有三种不同的抗原成分：白细胞干扰素抗原(Le),人成纤维细胞干扰素抗原（F）和T淋巴细胞干扰素抗原（T）。事实上，人白细胞产生的干扰素有99%为Le，1%为F，人成纤维细胞产生的干扰素占80-99.9%；而由Namalva细胞系（为一种由Burkitt淋巴瘤患者所得的类淋巴细胞系）产生的干扰素中有85%为Le, 15%为F. 唯有T淋巴细胞产生的干扰素则因应用不同诱生剂而不同，如以短小棒状杆菌诱导，主要为Le(＞95%); 如果用PHA或诱导,则主要产生T(＞80%). 根据世界卫生组织规定，统一个名，将人细胞所产生的几种干扰素，按其抗原性不同分为α、β和γ三类，Le干扰素即为α-干扰素（IFN－α），F干扰素为β干扰素（IFN－β）。T-干扰素即γ干扰素（IFN－γ）。
　　通过核酸内切酶切割分析，从而搞清了其全部核苷酸的顺序，由此又推导出全部核苷酸顺序，在α、β与γ三型干扰素中又因各型中又有氨基酸的顺序不同，又可分为若干亚型，α-干扰素至少有20个以上的亚型。而β-干扰素则有4个亚型，至于γ-干扰素只有一个亚型。α一干扰素的亚型为IFN－αl，IFN－α2，IFN－α3等或IFN－αA，IFN－αB，IFN－αC等。
　　2. 非天然 IFN
　　主要指基因工程IFN，即以DNA重组技术生产的IFN。基因工程IFN具有与天然IFN完全相同的生物学活性。
　　从cDNA途径建立IFN－2α无性繁殖系的基本步骤包括，人 IFN-αmRNA的诱生，mRNA的提取与纯化、基因克隆与重组、转化大肠杆菌和基因表达。

　　 干扰素的特性
　
　　1. 理化特性：
　　1)蛋白质通性：各种干扰素都具有蛋白质的通性：
　　　A. 不能经过诱析；
　　　B. 高速离心沉淀100，000grpm经4小时不能沉下；
　　　C.能被一些蛋白分解酶所分解（如胰蛋白酶、胃蛋白、酶与医乳蛋白酶等）失去活性，但不被核酸酶（DNase）及脂酶所降解。
　　2）其它特性与提纯：自然干扰素含糖（唾液酸残基等），为一种糖蛋白。经除去糖分后，并不影响干扰素的抗病活性。S tewar曾称这种除去糖分的干扰素为类干扰素（inter－feroid）。各种干扰素的分子量大小相差很大.
　　根据干扰素蛋白质通性，可应用各种理化与免疫学方法（如离子交换、凝胶电泳、亲和层析等方法）提纯干扰素制剂。现在能将干扰素制剂提纯至比活性为1×109IU／mg蛋白质。
　　2. 生物学特性：
　　1) 作用广谱性：自Isaacs发现流感病毒诱导产生的IFN能抑制该病毒在细胞内的生长繁殖后，很多学者相继用不同的病毒证实了这一现象。六十年代末，人们发现，IFN几乎可以抑制 FN作用敏感细胞感染的所有病毒，如乙型肝炎病毒、流感病毒、血友病病毒、脊髓灰质炎病毒及semlik森林病毒等。对某些细菌和支原体也有抑制作用。IFN这一特性极其重要，至今尚未发现任何一种物质象IFN这样具有如此"广谱性"。
　　2) 种属特异性：1969年, Meager将小鼠全射照射后，接种大鼠骨髓瘤细胞，用新城病毒感染小鼠，发现诱导小鼠体内的IFN对大鼠胚胎成纤维细胞感染的该病毒抑制力比小鼠同样细胞感染的同一病毒的抑制力大200倍。这种现象在不同种属门均可发现。所谓种属特异性是指，某一种属细胞产生的IFN只能作用于相同种属的其它细胞，使其获得"免疫力"，而对异种细胞没有保护作用。但个别种属门存在着交叉活性。
　　3) 差异性：干扰素虽能广泛地抑制多种病毒，但其抑制力不同,即不同病毒对干扰素的敏感性不同，干扰素对肿瘤的抑制作用也有同类现象。
　　4) 相对稳定性：IFN对PH和温度比较稳定。除 IFN－γ外，其它IFN在PH2的溶液中均不失活，在60℃下放置1小时也不影响各种IFN的活性（65℃下1小时IFN-γ失活），而且在低温下可长期保持。
　　5) 相对无害性: 外源性干扰素进入体内后,可发挥天然干扰素的作用，此过程受其他生理因子调控,而这种对调控作用是人体的正常生理过程, 因而较为安全。目前，使用干扰素的人次，可以亿计，按105U/kg体重/日肌注还未发现对人体的严重危害。

　　干扰素的肽链结构
　
　　人类干扰素的基因结构与其它哺乳类动物干扰素基因相似，编码区的A＋T含量为55%，3'端非编码区的远侧端C＋G含量极少，A＋T含量很高。人干扰素基因与多数哺乳动物干扰素基因基因不同的地方是，人β1和至少5种α干扰素基因，不论在编码区或非编码区，均无插入顺序（即内含子）。
　　基因工程IFNα－2a的多肽结构为：
MALTFALLVA LLVLSCKSSC SVGCDLPQTH SLGSRRTTML
LAGMRRISLF SCLKDRHDFG FPQEEF－GNQ FQKAETIPVL
HEMIQQIFNL FSTKDSSAAM DETLLDKFYT ELYQQLNDLE
ACVIQGVGVT ETPLMKEDSI LAVRKYFQRI TLYLKEKKYS
PCAWEVVRAE IMRSFSLSTN LQESLRSKE

　
　　因特芬概述

　　因特芬注射剂系采用重组DNA技术生产的一种无菌、稳定、高纯度的干扰素α-2a冻干制剂。干扰素型α-2a为水溶性蛋白，其分子量为19,200干扰素，是从含有人白细胞干扰素α-2a基因的大肠杆菌提取, 比活性为2-3×108国际单位/毫克蛋白.冻干后的注射剂为白色疏松块状.每支制剂含有100万、300万或500万国际单位的干扰素α-2a，以及缓冲剂和保护剂等。

　　因特芬临床资料

　　安全与耐受性
　　1．研究对象
　　受试者均系确诊的轻型丙肝患者，包括急性丙肝和慢性丙肝，年龄20－41岁,体重45－81kg。经体检及化验检查无其它病毒性肝炎、心、肺、肾、内分泌．癫滴．其他中枢神经系统功能紊乱和明显的造血系统疾病，。
　　2．试验方法
　　文献报告，rhIFN安全有效剂量是300－600万IU，本制品临床前研究过程中应用rhIFNα-2a 100万IU作人体试验未发现不良反应，国产互rhIFN α-1b临床用量达600万IU亦未发现明显不良反应，故确定本次试验随机分为四个剂量组：
　　第一组 每日300万IU组;
　　第二组 每日500万IU组;
　　第三组 每日600万IU组；
　　第四级 每日700万IU组。
　　从小到大剂量组递次进行，每日一次，肌肉注射，连续用药一个月。
　　3．结果和结论
　　1）临床表现：除肝病原有症状外，用药后主要出现发热，高热者伴有一过性"流感样"症状，表现全身不适、乏力、肌肉或关节酸痛，热度高低与剂量大小相关。
　　2）肝肾功能：各组肝功均在用药后1个月复常或下降，BUN治疗前后均无异常变化。
　　3）血尿常规：用药一个月内主要在较大剂量每日700万IU出现末梢白细胞下降2例。
　　结论为：
　　1）注射因特芬主要不良反应是发热或伴有"流感样"症状和末梢白细胞下降。发热程度随剂量增加而增高，但均为短期而自型消除，患者可耐受，无因发热而中断治疗的
　　2）治疗成人丙型肝炎以每日300万-600万IU肌注为宜。在此剂量范围内，连续每日用药一个月是可以耐受的，也是比较安全的。

　　药代动力学

　　 按照卫生部新药1期临床试验要求，在健康志愿者体内进行了因特芬(注射用rHIFN α－2a)药代动力学研究.
　　试验对象为在校健康学生, 对试验目的明确, 自愿作为受试者, 年龄18-22岁,体重53-62kg), 试验前一个月无发热史, 未曾用过影响免疫功能的药物及其它任何药物, 试验前检查肝、肾、心功能未见异常，血、尿常规检查在正常范围，HhsAg阴性.
　　试验方法如下: 给每例受试者肌注因特芬300万IU, 于给药前取4ml血液做空白试验,并分别于注射后0.5，1，2，4，8，12，24和36h在前臂静脉取血4ml，采用WISH/VSV系统检测血清中rHIFN α－2a。
　　试验结果：经统计，受试者均符合一房室开放模型，各项药动学参数分别为：Tp 4.93h、 T1/2A 1.82h、Tlag 0.62h、T1/2 5.39h、Cmax 55.57IU/ml、AUG 758.14Iu.h/ml, 24h的实测和计算浓度分别为7.88和7.26Iu/ml. 提示临床应用一日给药一次即可.

　　因特芬和丙型肝炎

　　1.研究对象
　　受试患者应符合以下条件:
　　1) 临床确诊的丙肝患者,急性丙肝和慢性丙肝;
　　2) 年龄2O～55岁；
　　3) 重症肝炎，有心、肾、内分泌、明显的造血系统疾病患者，已知对基因工程干扰素或其它干扰素制品过敏者，癫痫和其它中枢神经系统功能紊乱者，妊娠和哺乳期妇女，均不作受试者；
　　4) 均住院观察。
　　2. 治疗方法
　　受试者随机分为两组, A组为试验组,应用我公司生产的因特芬;B组为对照组,应用美国仙灵公司生产的Intron A(干扰能)。两组用药剂量、途径及疗程相同，分别用注射用水溶解药物3×106IU，每天一次×4周，继300万IU隔日一次×12-20周，总疗程16～24周。
　　在治疗过程中未加用其它可能影响疗效评价的药物，如其它抗病毒药物、免疫制剂及降酶药等，只给予维生素等一般保肝药物。
　　此次临床研究以干扰能做为有效药物对照，采用配对卡方检验方法，主要检验因特芬对ALT复常、HCV-RNA（PCR）转阴及抗HCV转阴与干扰能在统计学上有无显著差异，以评价应用国产因特芬的治疗效果和不良反应。
　　3．结果和结论
　　1）血清HCVM 治疗前HCV-RNA和抗HCV均阳性。治后HCV-RNA转阴率分别为71.4%和72.7%，差异不显著（P>0.05）。抗HCV转阴率分别为9.1%和6.5%，差异不显著。
　　2）肝功能变化 治前ALT均异常，治后ALT复常率分别为71.4%和67.5%，γ-GT复性率分别为51.9%和45.4%，SB复常率分别为90.9%和79.3%，均无显著差异。
　　3）不良反应 仍然以发热反应为主，发热率均达80%以上；伴有"流感样"表现，其次是WBC↓、腹泻、轻度脱发、极少数出现失眠、呕吐和皮疹。两组之间无显著差异（P>0.05）。
　　结论为：因特芬与干扰能相比，既具有相同疗效，而不良反应却较轻，且价格远比干扰能低，故是治疗丙肝较有前途的药物。

　　因特芬和小儿糜烂性口腔炎

　　选用200例糜烂性口腔炎住院或就诊的患儿进行临床观察,采用双盲法分为干扰素治疗组及对照组。依临床症状分轻、中、重型。
　　轻型：无全身症状，牙龈红肿20,口腔有散在溃疡。
　　中型：全身症状轻，牙龈红肿30,口腔粘膜局部溃烂。
　　重型：全身症状肿，牙龈红肿30,口腔全口粘膜溃烂，口周皮肤疱疹。
　　因特芬100万IU/ml每例患者每天使用一支连续两天,总剂量200万IU。每日上午、下午各一次治疗，每次剂量50万IU，实行局部皮下多点注射，一般3-4点，每点0.1ml，其余涂抹于患处表面。
　　
　　 结果表明：
　　1）溃烂缩小或消失；
　　2）口腔粘膜充血水肿基本消除；
　　3）疼痛减轻或消除。
　　结论为：应用因特芬治疗糜烂性口腔炎具有显著的疗效。

　　 因特芬临床应用

　　适应症
　　因特芬注射剂主要适用于急、慢性丙型病毒性肝炎的治疗。还适用于其它病毒感染性疾病及某些肿瘤疾病的治疗，如：慢性活动性乙型肝炎、糜烂性口腔炎、生殖器疣、疱疹、毛细胞白血病、慢性髓性白血病、多发性骨髓瘤、恶性黑色素瘤、卡波济氏肉瘤及非何杰金氏淋巴瘤等疾病。

　　剂量与用法
　　1．丙型肝炎
　　常用剂量为300-500万国际单位，肌肉或皮下注射。开始每日注射一次，连续四周，然后隔日注射，注射12-20周。总疗程16-24周。
　　[注]可与病毒唑联合用药，以提高远期疗效，简单方法如下：因特芬3-5MIU，TIW，至少六个月；病毒唑600-1200mg/天,至少6个月。应定期监测红细胞数及血红蛋白，当血红蛋白小于10g/L时,病毒唑减量；当血红蛋白小于8g/L时，病毒唑停药。
乙型肝炎：用药剂量及方法同丙型肝炎。
　　糜烂性口腔炎：建议用量为100万国际单位，每日一次，肌肉注射，同时可结合局部涂抹，2-3日即可。
　　尖锐湿疣：于患处基底部隔日注射0.1-1.0毫升（内含100万国际单位），连续三周，不能采用此法时可进行肌肉注射。
　　肿瘤：视病种及病情而异。开始时可皮下或肌肉注射300万国际单位，每日或隔日注射，根据病人耐受情况每周逐步增加剂量，如病人未出现病情迅速恶化或严重不耐性反应，应在适量剂量下继续用药。疗程视病情而定。
　　[注]因特芬联合化疗药物可治疗多发性骨髓瘤,使肿瘤负荷量长期保持较底水平, 提高化疗的完全反应率,延长缓解期及生存期。

　　副作用
　　因特芬不良反应温和，多为一过性或可逆性反应。可见短暂发热，一般为低度到中度。其它可见头痛、乏力、脱发、食欲不振、恶心及白细胞减少等症状。少见呕吐、失眠、及皮疹。上述症状程度一般较轻，不需特别处理、停药后可自行消失。治疗前或治疗中给予适量扑热息痛能有效地缓解发热和头痛等副反应症状。

　　禁忌症
　　即往对干扰素α-2a过敏者或有其它严重疾病而不能耐受本药之副反应者禁用本品.

　　注意事项
　　1．目前本品只有成人使用经验。小儿及孕妇应慎重使用。如出现不良反应，应立即停药，并给予相应治疗。
　　2．无菌开启西林瓶，以1毫升注射用水注入瓶内轻摇，待完全溶解后即可使用，溶解后不易久置。
　　其它内容

　　1．规格
　　100万、300万和500万国际单位/瓶三种规格。
　　2．贮存
　　本品贮存于2一8℃，暗处，勿冻勿热。
　　3．包装
　　西林瓶装。
　　4．有效期
　　本品有效期为三年。
　　5．批准文号
　　100万国际单位，卫药准字（1997）沈三生S一01号；
　　300万国际单位，卫药准字（1997）沈三生S-02号；
　　500万国际单位，卫药准字（1997）沈三生S-03号；
　　6．制造单位
　　沈阳三生制药股份有限公司
　　7．地址
　　沈阳经济开发区十号路1甲3号（110141）